Gentechnik: Die Klonierung

Gewünschtes DNA -Stück wird mit Restrktionsenzym ausgeschnitten Ein geeigneter Vektor (E.coli Plasmid mit zwei Resistenzgenen, z.B. Tetrazyklin und Ampicillin) wird mit gleichem Restriktionsenzym geschnitten, eine oder mehrere Schnittstellen müssen dabei im Bereich der Resistenzgene liegen. Vermischung von Vektoren und Fremd-DNA --> zufällige Neuzusammensetzung der DNA- Fragmente --> Einige Hybridvektoren (d.h. mit Fremdgenen) entstehen. Aufnahme der Vektoren durch E.coli via Transformation; Abtöten von Bakterien ohne Plasmid durch Ampicillin (und Bakterien mit defekter AmpR) Vermehren des restlichen Ansatzes in Petrischale Mit Stempeltechnik Duplikat erstellen Einen Ansatz mit Tetracyclin versetzen --> Absterben der Bakterien in deren TetR-Region die Fremd-DNA eingebaut wurde Vermehren der entsprechenden Kolonie aus anderer Schale